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液相色譜儀流動(dòng)相的正確使用和過(guò)濾脫氣

點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2021-12-09 11:30

一、液相色譜儀流動(dòng)相的正確使用

1、流動(dòng)相要臨用現(xiàn)配,貼好標(biāo)簽,寫(xiě)明有效期,配置日期等。

2、使用色譜級(jí)試劑,盡量使用0.2μm濾膜過(guò)濾含鹽流動(dòng)相,使用0.45μm濾膜過(guò)濾有機(jī)相,注意溶劑與濾膜的兼容性。

3、進(jìn)行梯度實(shí)驗(yàn)時(shí)要注意梯度變化過(guò)程中流動(dòng)相的互溶性,不能互溶的溶劑不可以直接切換,使用異丙醇作為過(guò)渡溶劑切換。

4、使用緩沖鹽的流動(dòng)相時(shí)注意過(guò)渡,不要直接使用高有機(jī)相沖,避免鹽析,并注意清洗泵柱塞桿。

5、對(duì)于等度純鹽相實(shí)驗(yàn),建議可以將配置好的流動(dòng)相在冰箱中冷藏,半天后更換放置至室溫的新的流動(dòng)相。其他等度條件水相與有機(jī)相預(yù)混后上機(jī),不要用泵比例閥在線(xiàn)混合。

二、液相色譜儀流動(dòng)相的過(guò)濾

所有溶劑使用前都必須經(jīng)0.45μm(或0.22μm)過(guò)濾,以除去雜質(zhì)微粒。用濾膜過(guò)濾時(shí),特別要注意分清有機(jī)相(脂溶性)濾膜和水相(水溶性)濾膜。有機(jī)相濾膜一般用于過(guò)濾有機(jī)溶劑,過(guò)濾水溶液時(shí)流速低或?yàn)V不動(dòng)。水相濾膜只能用于過(guò)濾水溶液,嚴(yán)禁用于有機(jī)溶劑,否則濾膜會(huì)被溶解。對(duì)于混合流動(dòng)相,可在混合前分別濾過(guò),如需混合后濾過(guò),選擇適當(dāng)?shù)臑V膜,選擇時(shí)可以參考濾膜化學(xué)兼容性表。

三、液相色譜儀流動(dòng)相的脫氣

流動(dòng)相常用脫氣方法:抽真空、超聲、吹氦等。超聲脫氣操作簡(jiǎn)單,成本低,10-20分鐘的超聲處理對(duì)許多有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑/水混合液的脫氣是足夠了(一般500mL溶液需超聲20-30min方可),此法不影響溶劑組成。超聲時(shí)應(yīng)注意避免溶劑瓶與超聲槽底部或壁接觸,以免玻璃瓶破裂,容器內(nèi)液面不要高出水面太多。離線(xiàn)脫氣法不能維持溶劑的脫氣狀態(tài),在停止脫氣后,氣體立即開(kāi)始回到溶劑中。在1-4小時(shí)內(nèi),溶劑又將被環(huán)境氣體所飽和。一般說(shuō)來(lái)有機(jī)溶劑中的氣體易脫除,而水溶液中的氣體較頑固。在溶液中吹氦是相當(dāng)有效的脫氣方法,這種連續(xù)脫氣法在電化學(xué)檢測(cè)時(shí)經(jīng)常使用。但氦氣昂貴,難于普及。

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